必发365

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Annexin V-FITC/EGFP/PE/APC

实验目的:通过带荧光标记的Annexin V检测各个样品的凋亡情况。

实验原理:细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。Annexin V是一种易于结合到磷脂类如PS的蛋白,可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就破坏了。因此,可建立一种用Annexin V结合在细胞膜表面作为凋亡的指示并结合一种染料(如PIDAPI7-AAD等)排除试验以检测细胞膜的完整性的检测方法。

实验仪器:低温高速离心机、流式细胞仪、孵育箱、荧光显微镜等

实验内容与方法:

1.收集细胞,洗涤、悬浮细胞;

2.Annexin V-EGFP(或其它)及PI(或其它)混匀,避光、反应;

3.荧光显微镜、激光共聚焦或流式细胞仪观察和检测。

客户提供实验信息:

1、实验信息(客户提供):      

                     样品信息                            (包括来源、全称等)

2、实验材料提供

  (1)样本材料

新鲜或冷冻细胞不少于2×105

 (2)试剂:

          采用必发365自产的Annexin V-EGFP/EGFP/PE/APC细胞凋亡检测试剂盒等。或可按客户要求代订和使用其它品牌公司试剂。

服务周期:1周以内(具体视样品数而定)

 

 

 

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正常A549细胞Annexin V-FITC/PI双染     A549细胞经双氧水诱导Annexin V-FITC/PC双染

荧光显微镜观察

正常A549爬片Annexin V-FITC/DAPI双染  549经双氧水诱导爬片Annexin V-FITC/DAPI双染

必发365          必发365

 

正常A549爬片Annexin V-FITC/DAPI双染   549经双氧水诱导爬片Annexin V-FITC/DAPI双染

 

结果提交:提交实验报告书(包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析)、原始数据、图片,文本或电子版。

实验范例:

流式细胞仪检测