必发365

产品中心PRODUCT
Tunel凋亡原位检测

实验目的:缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡

实验原理:本实验可检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA的断裂情况,其原理是不同标记(荧光或者生物素)的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂的DNA3OH末端,再通过荧光激发或者化学显色的方法,特异准确地定位正在凋亡的细胞,因而在显微镜下即可观察和计数凋亡细胞;由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。本实验适用于组织和细胞样本的凋亡原位检测。

实验仪器:低温高速离心机、光学或荧光显微镜、恒温孵育箱等

实验内容与方法:

一、样品处理

1、细胞样品:自然晾干的细胞样品固定;封闭;通透液促渗

2、冰冻样本:PBS浸润;封闭;通透液促渗

3、石蜡样品:脱蜡及水化;微波或蛋白酶K修复;封闭

二、标记反应

1、荧光标记:滴加TdT酶反应液,反应;荧光显微镜检测

2、生物素标记:滴加TdT酶工作液反应;滴加Streptavidin-HRP工作液反应;

             DAB显色;苏木素复染;显微镜观察拍照

客户提供实验信息:

1、实验信息(客户提供):      

样品信息                             (全称、来源、种属等) 

2、实验材料提供

1)样本材料:

²  冰冻组织样品需超低温保存

²   贴壁细胞必须爬片,本市可以上门取样后我们来固定,外地必须固定后再送样。悬浮细胞可充液或涂片固定好以后寄送

²   石蜡包埋组织可包埋后或固定好以后寄送

2)试剂:

              采用必发365自产TUNEL系列凋亡检测试剂盒等。或可按客户要求代订和使用其它品牌公司试剂。

服务周期:2周至5周(具体视样品数而定)

结果提交:提交实验报告书(包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析)、原始数据、图片,文本或电子版。

实验范例 :

必发365  必发365

经饥饿处理小鼠空肠                            小鼠肝损伤模型的肝组织