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Brdu标记法

生长曲线测定

实验目的:测定胞的生长曲线,计算细胞倍增时间 生长曲线测定

实验原理:细胞传代之后,经过短暂的悬浮然后贴壁,随后经过不同的潜伏期,即进入大量分裂的指数生长期。在细胞达到饱和密度后,停止生长,进入平顶期,然后退化衰亡。为准确描述整个过程中细胞数目的变化,须对细胞进行连续计数。通常计数7天。典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期,斜率较大的指数生长期,成平台状的平顶期及退化衰亡四个部分。

实验仪器:超净工作台、CO2培养箱、生物倒置显微镜、酶标仪等

实验内容与方法:

1.消化处于对数生长期的细胞,计数,调整为1×104/ml的细胞悬液,接种于6孔细胞培养板中,每孔1ml

2.分别于1d2d3d4d5d6d7d8d9d10d消化收集细胞,计数;

3. 绘制生长曲线,计算倍增时间T=t*ln(2)/(ln(N1)-ln(N0))

N0    the initial concentration of cells

N1    the final concentration of cells

t        the duration of culture

T       the doubling time

ln      natural logarithm

客户提供实验信息:

1、实验信息(客户提供):      

样品信息                            (包括来源、全称等)

2、实验材料提供

1)样本材料

新鲜或冷冻细胞不少于2×105

2)试剂:

MTTDMSO等常规试剂公司可以提供,相关药物需要客户自己购买,或委托我公司代购

服务周期:收到样品3周内提交结果(视样本数量适当调整周期)

结果提交:提交实验报告书(IC50、实验试剂与设备、实验过程、结果分析、原始数据、细胞图片等)。

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存活曲线测定

实验目的:测定细胞的存活曲线

实验原理:细细胞存活数据一般绘制成存活分率vs.剂量的对数图

实验仪器:超净工作台、CO2培养箱、生物倒置显微镜、酶标仪

实验内容与方法:

1. 消化对数生长期细胞,稀释细胞悬液,接种于6孔细胞培养板;

2. 加入受试样品,分别于1d2d3d4d5d6d7d8d

9d10d消化收集细胞,计数;

3. 绘制生长曲线,

客户提供实验信息:

1、实验信息(客户提供):      

                    样品信息                            (包括来源、全称等)

2、实验材料提供

1)样本材料

新鲜或冷冻细胞不少于2×105

2)试剂:

MTTDMSO等常规试剂公司可以提供,相关药物需要客户自己购买,或委托我公司代购

服务周期:收到样品3周内提交结果(视样本数量适当调整周期)

 

结果提交:提交实验报告书(IC50、实验试剂与设备、实验过程、结果分析、原始数据、细胞图片等)。

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